二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環(huán)境，培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值：7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%)，來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。

　　二氧化碳培養(yǎng)箱作為精密培養(yǎng)設備，要求CO2濃度、溫度、控制精度高，誤差小，使生物細胞，組織等的培養(yǎng)成功率、效率都得到改善。相對于普通培養(yǎng)箱，二氧化碳培養(yǎng)箱具有不可替代優(yōu)勢性能。

　　為什么大多數(shù)細胞培養(yǎng)需要用二氧化碳培養(yǎng)箱?用普通培養(yǎng)箱不行嗎?

　　我們知道，一般細胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間，由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中***重要的pH緩沖系統(tǒng))，大多數(shù)培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時，常常需要加入**量的碳酸氫鈉。

　　而對大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言，為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間，以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時細胞培養(yǎng)的器皿需要**程度的透氣，以便于氣體的交換。

　　那么采用其他pH緩沖系統(tǒng)是不是就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢?人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低，如果細胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的HCO3-會被耗盡，這樣會影響細胞的正常生長。所以大部分動物細胞的培養(yǎng)，還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。細胞培養(yǎng)液中常附加其他的pH緩沖系統(tǒng)，比如HEPES緩沖系統(tǒng)，來增加pH緩沖能力。在pH7.2-7.4之間有很強的緩沖能力，當透氣的培養(yǎng)器皿被拿到二氧化碳培養(yǎng)箱外面的時候，由于空氣中二氧化碳濃度很低，培養(yǎng)液中碳酸鹽緩沖系統(tǒng)就會失去效果，這時候緩沖系統(tǒng)就能繼續(xù)保持pH的穩(wěn)定。

　　對于細胞來說，非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存，培養(yǎng)箱本身是不會辨別的，而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內，因此箱體內能否**或**非常關鍵!　　病毒：由于病毒寄生生存，爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離，丟棄處理，相對來說容易處理，對操作者威脅較大;盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但生產疫苗是不**的。因此，二氧化碳培養(yǎng)箱潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。**：**生長的比較慢，不象**那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了;目前沒有好的抑制方法，包括現(xiàn)在常用的兩性霉素，一旦污染容易反復爆發(fā)，尤其孢子很難殺滅。支原體：支原體污染后，因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺，實則細胞已經(jīng)受到多方面潛在影響，如引起細胞變形，影響DNA合成，抑制細胞生長等，往往被大多數(shù)實驗者忽視。**：**污染后，培養(yǎng)基1-2天就會變色，對細胞生長影響明顯，應迅速將污染細胞與其它細胞系隔離，**后丟棄，還要用實驗室**劑**培養(yǎng)器皿和超凈臺。