安捷倫液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成，其中液相色譜柱的正確安裝和使用，是液相色譜工作的關(guān)鍵；也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。　　*：安捷倫液相色譜儀安裝條件　　一、環(huán)境要求：　　1、溫度：15～30℃　　2、日溫差：±3℃　　3、相對濕度：20%～85%　　4、地面：平滑、不易起塵　　5、安裝場所： 無震動、周圍無腐蝕性介質(zhì)、無電磁場干擾，操作臺縱深尺寸60cm以上，避免空調(diào)直吹風(fēng)，避免直射陽光?！　?、推薦液相色譜儀工作臺：長2米、寬0.8米，承重大于80公斤。建議離墻距離0.3米以上?！　∫话阍诎惭b的實(shí)際空間上，還要考慮：　　與其它儀器間距大于60cm，儀器后面板應(yīng)留有不小于50cm的空間，前面板至操作臺邊緣距離不小10cm；儀器安裝平穩(wěn)牢固，接入了UPS電源，儀器外殼與地線連接。　　二、電源要求：　　1、單相交流220V，(+5%～-10%)，50～60Hz，有單獨(dú)的良好接地?！　?、若電壓不穩(wěn)，需配置穩(wěn)壓電源，功率大于2.5千瓦?！　?、準(zhǔn)備1個(gè)合格的萬用接線板，總數(shù)不小于5個(gè)扁平三角接線插座?！　?、斷電續(xù)電能力：斷電情形，設(shè)備能持續(xù)運(yùn)行1小時(shí)以上。　　5、接地：安裝場所應(yīng)有可靠接地線裝置　　三、溶劑要求：　　1、二次重蒸餾水，1000毫升以上(建議用0.45微米水相濾膜過濾)?！　?、乙腈或甲醇(色譜純或優(yōu)級純)，1500毫升以上(建議用0.45微米有機(jī)相濾膜過濾)?！　∷?、操作系統(tǒng)：Windows XP 操作系統(tǒng)　　硬件要求：內(nèi)存不低于2G；硬盤不低于160G；配有網(wǎng)絡(luò)適配器(2個(gè)網(wǎng)卡)；帶光區(qū)驅(qū)動　　第二、安捷倫液相色譜儀安裝方法：　　1、液相色譜柱的結(jié)構(gòu)：　　a、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。　　柱接頭采用低死體積結(jié)構(gòu)，柱接頭是兩端螺紋組件，一端是為7/16英寸外螺紋，另一端是3/16英寸的內(nèi)螺紋(**外已規(guī)范化)。7/16英寸外螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接，中間放置壓壞用于密封。3/16英寸的內(nèi)螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接，中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積，在安裝色譜柱時(shí)，用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底，然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應(yīng)嚴(yán)格控制在2.5mm長或其他固定尺寸)?！　≡趦啥酥宇^內(nèi)，柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或?yàn)V網(wǎng))，用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失?？罩鹘M件均為316#不銹鋼材質(zhì)，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有**的腐蝕性，故使用時(shí)要注意，柱及連接管內(nèi)不能長時(shí)間存留此類溶劑，以避免腐蝕?！　、柱填料：　　液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進(jìn)行的，柱子的分類是依據(jù)填料類型而定?！　≌嘀憾嘁怨枘z為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種，其顆粒直徑在3—10 μm的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN，-NH2等官能團(tuán)即所謂的鍵合相硅膠?！　》聪嘀褐饕且怨枘z為基質(zhì)，在其表面鍵合十八烷基官能團(tuán)(ODS)的非極性填料。也有無定型和球型之分?！　〕Ｓ玫钠渌姆聪嗵盍线€有鍵合C8、C4、C2、苯基等，其顆粒粒徑在3—10 μm之間?！　?，色譜柱的安裝：　　a、拆開柱包裝盒，確認(rèn)色譜柱的類型、尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑?！　、擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用?！　、 按柱管上標(biāo)示的流動相流向，將色譜柱的入口端通過連接管與進(jìn)樣閥出口相連接(如條件允許，建議在柱前使用保護(hù)柱)；柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環(huán)。在接管時(shí)**要設(shè)法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘、壓環(huán)后盡量用力插到底，然后順時(shí)針擰緊空心螺釘，直到擰不動為止，再用扳手繼續(xù)順時(shí)針擰1/4-1/2圈，切記不要用力過大。如色譜柱通過流動相加壓后有漏液現(xiàn)象，請用扳手繼續(xù)順時(shí)針擰1/4圈，直至不漏液為止?！　〉谌⒁合嗌V柱的使用：　　色譜柱在使用前，進(jìn)行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是zui佳條件)，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性?！　?、樣品的前處理：　　a、使用流動相溶解樣品?！　、使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)?！　、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。　　2、流動相的配制：　　液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點(diǎn)：　　a、流動相對樣品具有**的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時(shí)間保留在柱中)。　　b、流動相具有**惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)?！　、流動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時(shí)能得到好的分離效果；同時(shí)降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。　　d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配制?！　、流動相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。　　f、在流動相配制好后，**要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用?！　?、流動相流速的選擇：　　因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱，要追求zui佳柱效，使用zui佳流速。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml/min，對于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8ml/min為佳?！　‘?dāng)選用zui佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長?？刹捎酶淖兞鲃酉嗟南礈鞆?qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí)，可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量)?！　∽⒁猓骸　.由于甲醇廉價(jià)，對于反相柱推薦使用甲醇體系(必須使用乙腈的場合除外)。　　b.對于正相柱推薦使用沸程為30-60℃的石油醚或提純后的己烷作流動相，沒有提純的己烷不得使用。用水使用超純水(電阻率大于18兆歐)，去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì)，有可能影響分析結(jié)果。　　c.含水流動相在實(shí)驗(yàn)前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動相不要放置時(shí)間過長。加入疊氮化鈉，防止**生長?！　.流動相要求使用0.45 μm濾膜過濾，除去微粒雜質(zhì)。　　e.使用HPLC級溶劑配制流動相，使用合適的流動相可延長色譜柱的使用壽命，提高柱性能?！　?、柱性能測試：　　啟動液相色譜儀：a、流動相流速設(shè)定為1ml/min。　　b、UV檢測器波長設(shè)定為254nm?！　∈褂贸鰪S測試時(shí)使用的流動相組成及測試樣品?！　∮涗洸⒂?jì)算測試結(jié)果。 液相色譜柱的結(jié)構(gòu)及主要功能

　　液相色譜儀由高壓液體泵分離系統(tǒng)、檢測器及液相色譜柱（含柱溫控制系統(tǒng)）等三部分組成。其中液相色譜柱的正確使用，是液相色譜工作的關(guān)鍵，也是采用液相色譜方法獲得準(zhǔn)確實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的必由之路。

　　一套無論多么**的液相色譜儀，如果得不到優(yōu)質(zhì)的色譜柱支持，也只能成為一臺液體輸送泵而已，毫無價(jià)值可言。反之，一根無論多么好的色譜柱，如果得不到**的液相色譜儀的控制，其作用與價(jià)值也會大打折扣。所以，液相色譜儀的性能決定了液相色譜的技術(shù)控制性能和數(shù)據(jù)采集與處理性能；液相色譜柱的性能直接關(guān)系到分離分析的準(zhǔn)確性與適用性，必須達(dá)到很高的性能才能為科學(xué)實(shí)驗(yàn)提供強(qiáng)有力的數(shù)據(jù)支持。二者必然相互影響相互促進(jìn)。

　　液相色譜柱的結(jié)構(gòu)及主要功能:

　　液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲（封頭）與柱填料等組成。

　　柱管：多用不銹鋼制成，若果使用時(shí)柱壓不高于70kg/cm2時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。

　　壓帽：即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽，中部有小孔，多為聚四氟乙烯制成，用于固定篩板。

　　密封環(huán)：位于接頭螺旋環(huán)內(nèi)壁的彈性環(huán)，多為聚四氟乙烯制成，用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。

　　篩板：位于色譜柱兩端緊貼柱管端的篩網(wǎng)狀薄片，由燒結(jié)不銹鋼或鈦合金制成，孔徑取決于填料粒度，一般為0.2~20&um(5~10&um)。用于防止填料從柱管內(nèi)漏出。

　　接頭：柱兩端連接流動相與柱管的中空環(huán)套，由不銹鋼制成。用于柱管路聯(lián)通與柱端高壓固定。

　　封頭：柱兩端的密封螺絲，用于保存色譜柱時(shí)封頭。

　　柱填料：裝填于柱管內(nèi)的固定相擔(dān)體，其直接決定了色譜柱的類型與用途，是色譜柱的核心。多為無定形或球形硅膠基質(zhì)，也有環(huán)糊精、活性炭、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙酸酯、氧化鋁等基質(zhì)。用于色譜分離。